固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Bouin's固定液(Bouin’s Solution)主要由醛酸混合而成,可沉淀蛋白引起组织收缩,但不会使组织硬化, 其醛和酸混合后,穿透组织速度加快,固定均匀,组织收缩轻微,对细胞的微细结构显示的很清晰,为一种良好的固定液。尤其对Masson三色法等的结缔组织和肌纤维染色有媒染作用,经其固定后的组织着色鲜艳。该固定液也可能软化皮肤和肌腱,以利于切片。
该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
1. 一般仅需固定30~60min。如果组织块大,可适当延长固定时间,但不宜超过24h。
2. 用Bouin's固定液固定后,组织可稍微流水冲洗或不冲洗直接转入70%的乙醇脱水,组织留有一点黄色,对染色也无影响。
1. Bouin's固定液对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。
2. 组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。
3. 固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。
4. 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5. 取出新鲜组织后,应及时固定;无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。