Diphenylterazine (DTZ) 是一种合成腔肠素类似物和生物发光剂,类似于腔肠素(Coelenterazine,CTZ),是一种很好的荧光素酶底物。DTZ本身仅产生很少的背景,因此具有极好的信噪比。DTZ在毫摩尔浓度下对细胞的毒性极小,且在未转染的BALB/c小鼠中注射Diphenylterazine不会产生任何背景发射。此外,DTZ可以追踪异种移植NU/J小鼠模型中的肿瘤生长。
本产品为科研试剂,广泛应用于分子生物学、细胞生物学、药理学等科研方面,严禁用于人体。产品主要用途如下:
1.生物发光成像:DTZ作为发光底物,与荧光素酶反应发光,用于活体和细胞成像。
2.化学发光分析:用于检测和量化特定分子,通过化学反应产生发光信号,便于分析。
3.高灵敏度检测:用于需要高灵敏度的检测实验,如酶活性测定、核酸杂交和免疫分析。
4.药物筛选:用于报告基因活性或标记生物分子,辅助筛选候选药物。
体外实验:
溶解性(25°C):>33mg/ml (乙醇、甲醇、DMSO、DMF);微溶于水
*请参考溶解度信息来选择合适的溶剂配制储备液。配成溶液后,请分装保存,避免反复冻融。
*Purescix内部测试了所有化合物的溶解度,若实际溶解度与公布的值略有不同为正常现象,是由于批次之间的轻微差异造成的,请适当调整之后使用。
体内实验(现用现配):
10% DMF→ 40% PEG300→ 5% Tween-80→ 45% Saline
此方案可获得 ≥ 1.11 mg/mL (2.94 mM)的澄清溶液
*以上溶解方案仅供参考,您根据实验动物和给药方式进行适当的调整。
*体内实验的工作液,建议现用现配,当天使用。
*如果在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶。
体外—基因检测实验:
DTZ是Antares2的最佳底物,检测细胞内Antares2表达情况的方法如下:
(1) 在含有PC3/CD63-Antares2细胞的培养基中加入500、50、5、0.5 μM的Diphenylterazine。
(2) 使用生物发光成像系统成像。[5]
体内—活体成像分析:
(1) 利用BALB/c小鼠,通过将表达teLuc、Antares、Antares2和FLuc的肿瘤细胞注射到BALB/c小鼠的尾静脉,转染BALB/c小鼠。
(2) 在FLuc生物发光减弱后,腹腔注射0.3µmol/mouse (1.13 mg.mL-1/100 μL/mouse) Diphenylterazine或furimazine。
在20分钟的过程中,以每帧1分钟的曝光时间对小鼠进行成像。[4]
1. 我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理(如0.22μm滤膜过滤),除去热原细菌,否则会导致染菌。
2. 溶解性是在室温下测定的,如果温度过低,可能会影响其溶解性。
3. 科研试剂,严禁用于人体和临床。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5. 部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。
[1]. Yeh HW, et al. Red-shifted luciferase-luciferin pairs for enhanced bioluminescence imaging. Nat Methods. 2017 Oct;14(10):971-974.
[2]. Yeh AH, et al. De novo design of luciferases using deep learning. Nature. 2023 Feb;614(7949):774-780.
[3]. Practical Notes for teLuc-DTZ and Antares2-DTZ (updated 07/29/2019).
[4]. Hsien-Wei Yeh, et al. ATP-Independent Bioluminescent Reporter Variants To Improve in Vivo Imaging. ACS Chem Biol. 2019 May 17;14(5):959-965.
[5]. Hikita T, Miyata M, Watanabe R, Oneyama C. In vivo imaging of long-term accumulation of cancer-derived exosomes using a BRET-based reporter. Sci Rep. 2020;10(1):16616.