产品描述:STZ (Streptozotocin)是一种源自无色链霉菌的葡萄糖胺亚硝基脲衍生物,是一种DNA甲基化的、致癌的、抗菌的以及糖尿病诱导剂。Streptozotocin 可诱导自噬与凋亡。在溶液中不稳定,请现配现用!
体外研究(In Vitro):【来源于公开文献,仅供参考】
Streptozocin(10mM)可抑制大鼠β胰岛素瘤细胞Rin-5F细胞活力[1]。
Streptozocin(2.5mM;48小时)可显著降低神经干细胞的GLUT3 mRNA 的相对表达水平[2]。
Streptozotocin(15mM;1小时)会诱导小鼠胰岛β细胞INS-1的细胞凋亡;(30 mM)引起细胞坏死(22%)及细胞凋亡(17%) [3]。
体内研究(In Vivo):【来源于公开文献,仅供参考】
1. Streptozocin的溶解方法,仅供参考[4]:
(1) 溶剂准备:0.1 M 柠檬酸缓冲液 (HY-B1610N)
液体 A:称取2.1g柠檬酸 (MW=210.14),加双蒸水至100 mL,溶解。
液体 B:称取2.94 g柠檬酸钠 (MW=294.10),加双蒸水至100 mL,溶解。
柠檬酸缓冲液:按 1.32:1 的比例混合溶液A 和溶液B。测定pH值并调整至4.2~4.5。然后0.22 μm过滤备用。
(2)Streptozocin工作溶液准备
使用上述缓冲液制备Streptozocin工作液(在冰浴中制备)。工作液应立即使用或存放于4°C,并在30分钟内完成注射。
2. 建立糖尿病模型[4]
(1)诱导Ⅰ型糖尿病 (T1DM)
原理:通过直接破坏动物的胰岛β细胞来诱发Ⅰ型糖尿病。
具体造模方法:
(2)诱导Ⅱ型糖尿病 (T1DM)[4]
原理:通过部分破坏动物的胰岛β细胞、使外周组织对胰岛素不敏感,以及给实验动物喂食高热量饮食来诱发的Ⅱ型糖尿病。
具体造模方法:
注:
A. 实验动物饲养于通风、清洁的动物房中,室温(24±2)℃,相对湿度(50±5) %,12小时光照和12小时黑暗循环进行,所有实验动物均自由摄食、饮水。
B. 在任何侵入性操作之前,实验动物会进行麻醉。
C. 注射Streptozocin前,实验动物禁食12~20小时,可提高糖尿病成模率。
(3)建立糖尿病模型操作过程注意事项
A. 不同动物物种对STZ的敏感性差异很大,建议在给药前禁食12~20小时,增加胰腺β细胞对STZ的敏感性。
B. STZ给药需要快速注射;
C. STZ 处理后,实验动物因胰腺β细胞的大规模坏死和胰岛素的突然释放而导致致命性低血糖死亡,通常在注射后48小时内发生。为防止这种情况,最好在STZ给药后定期给动物提供 10%蔗糖水。如果使用单一的高剂量STZ糖尿病小鼠方案时动物死亡率超过 20%,应在 STZ给药后6小时内腹腔注射5%葡萄糖溶液,可避免因注射时血糖过低实验动物死亡。
D. 不建议直接使用文献中的给药方法和剂量,需要进行预实验,应参照预实验的结果确定正式实验时STZ的给药量,尽量不要盲目按照文献上或他人的给药量来直接使用,鼠均重和空腹(低糖状态)抗药力、禁食时长、注射选时,以及之前饲养过程、测糖选时等都不相同,通过预实验来确定符合自己实验鼠的给药剂量,才是最科学的。
3. 造模成功指标
血糖水平: 血糖值≥300 mg/dL(16.7 mmoL/L)。
其他指标: 通常伴随着饮水量增加、尿量增加和体重减轻。随着糖尿病的发生,血清生化指标如总胆固醇、天冬氨酸转氨酶、甘油三酯和低密度脂蛋白也显著升高。