ML364

体外实验：

溶解性(25°C)：乙醇、甲醇、水、DMSO、DMF：＞33mg/ml

*请参考溶解度信息来选择合适的溶剂配制储备液。配成溶液后，请分装保存，避免反复冻融。

*Purescix内部测试了所有化合物的溶解度，若实际溶解度与公布的值略有不同为正常现象，是由于批次之间的轻微差异造成的，请适当调整之后使用。

体内实验(现用现配)：

方案一：

10%DMSO→ 40%PEG300→ 5%Tween-80→ 45%Saline

此方案可获得≥2.5mg/ml（4.83mM）的澄清溶液

以1mL工作液为例，取100μL25mg/ml的澄清DMSO储备液加到400μLPEG300中，混合均匀；向上述体系中加入50μLTween-80，混合均匀；然后继续加入450μL生理盐水定容至1mL。

方案二：

10%DMSO→ 90%玉米油

此方案可获得≥2.5mg/ml（4.83mM）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。

以1mL工作液为例，取100μL 25mg/ml的澄清DMSO储备液加到900μL玉米油中，混合均匀。

*以上溶解方案请先按照上述体外实验溶解数据配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂。

*以上溶剂前显示的百分比是指该溶剂在终溶液中的体积占比。

*以上溶解方案仅供参考，您根据实验动物和给药方式进行适当的调整。

*体内实验的工作液，建议现用现配，当天使用。

*如果在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶。

产品描述：ML364是一种泛素蛋白特异性肽酶（USP2）的高效特异性抑制剂（IC50=1.1 μM），可直接结合 USP2 （Kd=5.2 μM），诱导细胞周期蛋白D1降解，并引起细胞周期停滞和凋亡。它抑制USP8，与USP2密切相关，同一实验的IC50值为0.95 μM。ML364增加HCT116结直肠癌细胞cyclin D1降解(IC50 = 0.97 ?M)。ML364增加线粒体活性（ROS）水平，降低胞内ATP含量。还可抑制同源重组（HR）介导的DNA修复。

IC50：USP2：IC50: 1.1 μM；Kd: 5.2 μM

           USP8：0.95 μM

体外研究(In Vitro)：【来源于公开文献，仅供参考】

ML364 (5-20 μM; 24-48 hours) inhibits LnCAP and MCF7 cells viability in a dose-dependent manner[1]。

ML364 (10 μM; 2-24 hours) reduces cyclin D1 protein levels in a time-, dose-, and proteasome-dependent manner in HCT116 cells and Mino cells[1]。ML364 significantly enhanced the inhibitory effects of 17-AAG to hinder the cell cycle progression and curb the growth of breast cancer cells with ErbB2 overexpression[2]。

体内研究(In Vivo)：【来源于公开文献，仅供参考】

ML364(5mg/kg/d，3w；腹腔注射；female nude mice，ErbB2-overexpressing HCC1954 inoculated)有效抑制了HCC1954荷瘤的生长[2]。

1. 我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理（如0.22μm滤膜过滤），除去热原细菌，否则会导致染菌。

2. 溶解性是在室温下测定的，如果温度过低，可能会影响其溶解性。

3. 科研试剂，严禁用于人体和临床。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。

[1]. Davis MI, Pragani R, Fox JT, Shen M, Parmar K, Gaudiano EF, Liu L, Tanega C, McGee L, Hall MD, McKnight C, Shinn P, Nelson H, Chattopadhyay D, D'Andrea AD, Auld DS, DeLucas LJ, Li Z, Boxer MB, Simeonov A. Small Molecule Inhibition of the Ubiquitin-specific Protease USP2 Accelerates cyclin D1 Degradation and Leads to Cell Cycle Arrest in Colorectal Cancer and Mantle Cell Lymphoma Models. J Biol Chem. 2016 Nov 18;291(47):24628-24640.

[2]. Zhang, J., Liu, S., Li, Q. et al. The deubiquitylase USP2 maintains ErbB2 abundance via counteracting endocytic degradation and represents a therapeutic target in ErbB2-positive breast cancer. Cell Death Differ 27, 2710–2725 (2020).

[3]. Hashimoto M, et al. Inhibition of ubiquitin-specific protease 2 causes accumulation of reactive oxygen species, mitochondria dysfunction, and intracellular ATP decrement in C2C12 myoblasts. Physiol Rep. 2019 Jul;7(14):e14193.