基本信息
分子式： | C32H37N4S |
分子量： | 509.73 |
别名： | Green-DNA Dye |
外观： | 橘色粉末 |
EX/Em： | 480/520 nm |
储存条件： | −20℃，避光防潮密闭干燥 |
运输条件： | 湿冰运输（按季节） |
溶解性数据
溶解性数据：
溶解性(25°C)：溶于DMSO
*请参考溶解度信息来选择合适的溶剂配制储备液。配成溶液后，请分装保存，避免反复冻融。
*Purescix内部测试了所有化合物的溶解度，若实际溶解度与公布的值略有不同为正常现象，是由于批次之间的轻微差异造成的，请适当调整之后使用。
产品简介
产品描述:SYBR Green I是一种特制的不对称花菁染料，结合核酸后，荧光会增强 >1000 倍，常用于检测核酸。
在定量PCR中，SYBR Green I可与双链DNA（dsDNA）非特异性结合后发出荧光，进而通过检测反应体系中的SYBR Green I 荧光强度，达到检测PCR 产物扩增量的目的。游离状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，一旦与dsDNA结合，其荧光增加1000倍，一个反应发出的全部荧光信号与出现的dsDNA量成比例，且会随扩增产物的增加而增加；所以通过检测PCR 反应液中的荧光信号强度，可以对目的基因进行准确定量，同时还可以测定扩增的目的DNA片段的熔解温度。
在电泳分析中，SYBR Green I染色操作简单，无须脱色或冲洗，至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。
SYBR Green I与dsDNA的小沟结合，激发波长480 nm。其荧光发射峰波长为520nm。
产品应用:【来源于公开文献，仅供参考】
SYBR Green I用于DNA染色，适用于聚合酶链式反应（PCR）[1]。
SYBR Green I实时定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR），用于逆转录cDNA染色[2]。
SYBR Green I用于环介导等温扩增（LAMP）[3]。
SYBR Green I评估精子膜的完整性[4]。
SYBR Green I用作流式细胞术中的荧光染料[2]。
使用方法
【来源于公开文献，仅供参考】
一、SYBR Green I 法qPCR检测
1. 将SYBR Green I高纯粉末溶于DMSO配置成10000×溶液。
2. 使用时，配制PCR反应混合液，将10000×SYBR Green I浓缩液加入到PCR反应体系，使终浓度为0.5×（0.2×到1×之间调整）。以上操作建议在冰上进行。
3. 反应液配制方法和PCR 扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明。
4. Realtime PCR 扩增仪的使用方法，请参照各仪器说明书。
二、SYBR Green I 预染凝胶方法
5. 该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳。
6. 工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的SYBR Green I 稀释100倍，即为SYBR Green I 工作液。SYBR Green I 工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
7. 制胶：按常规方法制胶，不添加任何染料。
8. 样品染色：向分析样品中加入SYBR Green I 工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使SYBR Green I 与样品中DNA充分结合。SYBR Green I 工作液加入量为总上样量的1/10。
9. DNA Marker 染色：将5μL DNA Marker 和5μL DNA Marker 稀释液和1μLSYBR Green I 工作液混匀，室温放置5分钟，使SYBR Green I 与DNA充分结合。
10. 上样、电泳：按常规操作。使用紫外光线进行成像分析。
三、SYBR Green I 后染凝胶方法
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用PH 7.0 - 8.5 的缓冲液（如：TAE，TBE 或 TE），将SYBR Green I 浓缩液稀释成1x，制成染色溶液。
3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。
聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上，让工作液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。
注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2. 使用浓度对荧光PCR结果的影响：SYBR Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低，这就意味着低拷贝的样品可能无法检出；而在高浓度时，将会抑制PCR反应，降低PCR反应效率。所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度，反应的终浓度为0.2×到1×之间。
3. 镁离子浓度的影响：提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时，镁离子浓度比无SYBR Green I 的普通 PCR 反应高出0.5～3mM。
4. 科研试剂，严禁用于人体和临床。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
6. 部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。
参考文献
[1]. Xuan Jin, Stephen T. Yue, K. Sam Wells, Victoria L. Singer. SYBR Green I and SYBR Green II New ultrasensitive fluorescent stains for detecting picogram levels of nucleic acids in polyacrylamide or agarose gels. The FASEB Journal,1994,8,1266.
[2]. Woodrow CJ, Wangsing C, Sriprawat K, Christensen PR, Nosten F, Rénia L, Russell B, Malleret B. Comparison between Flow Cytometry, Microscopy, and Lactate Dehydrogenase-Based Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Plasmodium falciparum Drug Susceptibility Testing under Field Conditions. J Clin Microbiol. 2015 Oct;53(10):3296-303.
[3]. Oyhenart J, Martínez F, Ramírez R, Fort M, Breccia JD. Loop mediated isothermal amplification of 5.8S rDNA for specific detection of Tritrichomonas foetus. Vet Parasitol. 2013 Mar 31;193(1-3):59-65.
[4]. Shaliutina O, Shaliutina-Kolešová A, Lebeda I, Rodina M, Gazo I. The in vitro effect of nonylphenol, propranolol, and diethylstilbestrol on quality parameters and oxidative stress in sterlet (Acipenser ruthenus) spermatozoa. Toxicol In Vitro. 2017 Sep;43:9-15.
Specifications
| 规格 | 100mg or 1g |
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